凯氏定氮法原理是什么？
凯氏定氮法原理是：
蛋白质是含氮的有机化合物。蛋白质与浓 *** 和催化剂一同加热硝化，使蛋白质分解，分解的氨与 *** 结合生成 *** 铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以 *** 或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，并换算成蛋白质含量。含氮量*6.25=蛋白含量。
凯氏定氮法的注意事项：
1、样品应是均匀的。固体样品应预先研细混匀，液体样品应振摇或搅拌均匀。
2、样品放入定氮瓶内时，不要沾附颈上。万一沾附可用少量水冲下，以免被检样消化不完全，结果偏低。
3、消化时如不容易呈透明溶液，可将定氮瓶放冷后，慢慢加入30%过氧化氢（H2O2）2-3ml，促使氧化。
4、在整个消化过程中，不要用强火。保持和缓的沸腾，使火力集中在凯氏瓶底部，以免附在壁上的蛋白质在无 *** 存在的情况下，使氮有损失。
凯氏定氮法是什么 什么是凯氏定氮法
1、凯氏定氮法是由丹麦化学家凯道尔于1883年建立的，现已发展为常量、微量、平微量凯氏定氮法以及自动定氮仪法等，是分析有机化合物含氮量的常用 *** 。 凯氏定氮法的理论基础是蛋白质中的含氮量通常占其总质量的16%左右(12%~一19%),因此，通过测定物质中的含氮量便可估算出物质中的总蛋白质含量(假设测定物质中的氮全来自蛋白质)，即: 蛋白质含量=含氮量/16%。
2、凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种 *** 。即在有催化剂的条件下，用浓 *** 消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气蒸馏出来并为过量的硼酸液吸收，再以标准盐酸滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量 *** 。
凯氏定氮法的原理是什么？
凯氏定氮法是植株全氮量测定最经典的 *** 。
*** 原理：植株样品在 *** 钾和 *** 铜混合催化剂作用下，用浓 *** 消煮，使氮转化成为 *** 铵，然后加碱蒸馏，逸出的氨被硼酸吸收，用稀H2SO4滴定终点，根据标准酸的用量计算出植株含氮量。
凯氏定氮法测定食品中蛋白质含量的原理和基本操作 *** 是什么?
原理：有机含氮化合物与浓 *** 共热消化,氮转化为氨,再与 *** 结合成 *** 铵. *** 铵与强碱反应,放出氨.将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中,再用标准碱溶液进行滴定.根据测得的氨量,计算样品的总氮量.
、试剂与材料：
浓 *** 、 *** 钾- *** 铜粉末(称取80g *** 钾和20g *** 铜(五水),0.3g二氧化硒研细混合)、30%氢氧化钠溶液、2%硼酸溶液、0.01M标准盐酸、混合指示剂(田氏指示剂)储存液(取50ml0.1%甲烯蓝乙醇溶液与200ml0.1%甲基红溶液混合,储存于棕色瓶中备用.此指示剂在PH5.2为紫色;PH为5.4为暗灰色或灰色;PH5.6为绿色;变色点为PH5.4)、硼酸-田氏指示剂混合液(100ml2%硼酸溶液,滴加约1ml田氏指示剂,摇匀后,溶液呈紫红色)、蛋白质样品、容量瓶、吸管、凯氏烧瓶、凯氏定氮蒸馏装置、微量滴定管、电炉
三、操作 ***
1、样品处理：固体样品,应在105℃干燥至恒重.液体样品可直接吸取一定量,也可经适当稀释后,吸取一定量进行测定,使每一样品的含氮量在0.2-1.0mg范围内.
2、消化：取一定量样品,于50ml干燥的凯氏烧瓶内.加入300mg *** 钾- *** 铜混合粉末,再加入3ml浓 *** .用电炉加热,在通风厨中消化,瓶口加一小漏斗.先以文火加热,避免泡沫飞溅,不能让泡沫上升到瓶颈,待泡沫停止发生后,加强火保持瓶内液体沸腾.时常转动烧瓶使样品全部消化完全,直至消化液清澈透明.
另取凯氏瓶一个,不加样品,其它操作相同,作为空白试验,用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质,以对样品进行校正.
3、蒸馏：将微量凯氏蒸馏装置洗涤(先用水蒸气洗涤)干净.将凯氏烧瓶中的消化液冷却后,全部转入100ml的容量瓶,用蒸馏水定容至刻度.
吸取20ml稀释消化液,置于蒸馏装置的反应室中,加入10ml30%氢氧化钠溶液,将玻璃塞塞紧,于漏斗中加一些蒸馏水,作为水封.
取一三角瓶,加入10ml硼酸-田氏指示剂混合液,置于冷凝管之下口,冷凝管口应浸没在硼酸液面之下,以保证氨的吸收.
加热水蒸汽发生器,沸腾后,夹紧夹子,凯氏蒸馏.三角瓶中的硼酸-指示剂混合液,吸收蒸馏出的氨,由紫红色变为绿色.蒸馏15min,让硼酸液面离开冷凝管口,再蒸1-2min以冲洗冷凝管口.空白试验按同样操作进行.
4、滴定：样品和空白均蒸馏完毕后,用0.01M标准盐酸滴定,至硼酸-指示剂混合液由绿色变回淡紫色,即为滴定终点.
四、计算 样品总氮量(mg)=(A-B)×c×14×100/20
式中：A：样品滴定时消耗的标准盐酸体积 B：空白滴定时消耗的盐酸体积 C：标准盐酸的当量浓度 14：氮的相对分子量 20：用于蒸馏的稀释消化液体积 100：稀释消化液的体积
样品中粗蛋白含量(mg)=样品总氮量(mg)×6.25
凯氏定氮法与分光光度法的优缺点
凯氏定氮法的优缺点优点①可用于所有食品的蛋白质分析中；②操作相对比较简单；③实验费用较低；④结果准确，是一种测定蛋白质的经典 *** ；⑤用改进 *** （微量凯氏定氮法）可测定样品中微量的蛋白质缺点①最终测定的是总有机氮，而不只是蛋白质氮；②实验时间太长(至少需要2h才能完成)；③精度差，精度低于双缩脲法；④所用试剂有腐蚀性
分光光度法的优缺点优点1灵敏度高 2仪器设备简单，操作简便、快速 3应用广泛缺点是 1准确度相对不高2有的检测不可用，有限制性
凯氏定氮法原理是什么?
将有机化合物与 *** 共热使其中的氮转化为 *** 铵。在这一步中，经常会向混合物中加入 *** 钾来提高中间产物的沸点（从337℃到373℃）。样本的分解过程的终点很好判断，因为这时混合物会变得无色且透明（开始时很暗）。
在得到的溶液中加入少量氢氧化钠，然后蒸馏。这一步会将铵盐转化成氨。而总氨量（由样本的含氮量直接决定）会由反滴定法确定：冷凝管的末端会浸在硼酸溶液中。氨会和酸反应，而过量的酸则会在甲基橙的指示下用碳酸钠滴定。滴定所得的结果乘以特定的转换因子就可以得到结果。
通过凯氏定氮法测得的含氮量一般被称作总凯氮量。总凯氮量有时并不能真正地反映样本中的蛋白质含量，因为所测定的部分含氮量可能不是由蛋白质转化来的。
应用
凯氏定氮法的普遍适用性、精确性和可重复性已经得到了国际的广泛认可。它已经被确定为检测食品中蛋白质含量的标准 *** 。
但是，这种 *** 并不能给出真实的蛋白质含量，因为所测定的氮可能不仅仅是由蛋白质转化来的。这可以从2007年美国宠物食品污染事件和2008年中国毒奶粉事件等食品安全事件中被体现：三聚氰胺，一种含氮量较高的物质，被添加到了食品中以伪造较高的含氮量。
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